Mewn ymchwil fiolegol, defnyddir polypeptidau â dilyniant hir fel arfer.Ar gyfer peptidau â mwy na 60 o asidau amino yn y dilyniant, defnyddir mynegiant genynnau a SDS-PAGE yn gyffredinol i'w cael.Fodd bynnag, mae'r dull hwn yn cymryd amser hir ac nid yw'r effaith gwahanu cynnyrch terfynol yn dda.
Heriau ac atebion ar gyfer synthesis peptid hir
Yn y synthesis o peptidau hir, rydym bob amser yn wynebu problem, hynny yw, mae rhwystr sterig yr adwaith cyddwyso yn cynyddu gyda chynnydd y dilyniant yn y synthesis, ac mae angen addasu'r amser adwaith i wneud yr adwaith yn gyflawn.Fodd bynnag, po hiraf yw'r amser adwaith, y mwyaf o sgîl-effeithiau a gynhyrchir, a ffurfir cyfran o'r peptid targed.Gweddillion o'r fath - mae cadwyni peptid diffygiol yn amhureddau allweddol a gynhyrchir mewn synthesis peptid hir.Felly, yn y synthesis o peptid hir, y broblem allweddol y mae'n rhaid i ni ei goresgyn yw archwilio'r amodau adwaith o ansawdd uchel a'r dulliau adwaith, er mwyn gwneud yr adwaith cyddwyso asid amino yn fwy cynhwysfawr a llawn.Yn ogystal, lleihau'r amser adwaith, oherwydd po hiraf yw'r amser adwaith, po fwyaf o adweithiau ochr na ellir eu rheoli, y mwyaf cymhleth yw'r sgil-gynhyrchion.Felly, crynhoir y tri phwynt canlynol:
Gellir defnyddio synthesis microdon: Ar gyfer rhai asidau amino a geir yn y broses synthesis nad ydynt yn hawdd eu hintegreiddio, gellir defnyddio synthesis microdon.Mae gan y dull hwn ganlyniadau rhyfeddol, ac mae'n lleihau'r amser adwaith yn fawr, ac yn lleihau ffurfio dau sgil-gynnyrch allweddol.
Gellir defnyddio dull synthesis darn: Pan fydd rhai peptidau yn anodd eu syntheseiddio trwy ddulliau synthesis cyffredin ac nid yw'n hawdd eu puro, gallwn fabwysiadu'r cyddwys cyfan o nifer o asidau amino mewn segment penodol o'r peptid i'r gadwyn peptid yn ei gyfanrwydd.Gall y dull hwn hefyd ddatrys llawer o broblemau yn y synthesis.
Gellir defnyddio synthesis Acylhydrazide: acylhydrazide synthesis o peptidau yn ddull o synthesis solet-cyfnod o N-terminal Cys peptid a C-terminal polypeptide hydrazide adwaith dethol cemegol rhwng ffurfio bondiau amid i gyflawni dull bondio peptid.Yn seiliedig ar leoliad Cys yn y gadwyn peptid, mae'r dull hwn yn rhannu'r gadwyn peptid gyfan yn ddilyniannau lluosog ac yn eu syntheseiddio yn y drefn honno.Yn olaf, ceir y peptid targed trwy adwaith cyddwyso cyfnod hylif.Mae'r dull hwn nid yn unig yn lleihau amser synthesis peptid hir yn fawr, ond hefyd yn cynyddu purdeb y cynnyrch terfynol yn sylweddol.
Puro peptid hir
Mae hynodrwydd peptidau hir yn anochel yn arwain at gydrannau cymhleth peptidau crai.Felly, mae hefyd yn her puro peptidau hir gan HPLC.cyfres amyloid o broses puro polypeptid, gan amsugno llawer o brofiad a'i ddefnyddio'n llwyddiannus wrth buro peptid hir.Trwy fabwysiadu offer newydd, cymysgu systemau puro lluosog, gwahanu dro ar ôl tro a dulliau profiad eraill, roedd cyfradd llwyddiant puro peptid hir wedi gwella'n fawr.
Amser post: Ebrill-18-2023