Yn aml mae gan antigenau protein ailgyfunol nifer o epitopau gwahanol, rhai ohonynt yn epitopau dilyniant ac mae rhai yn epitopau adeileddol.Mae gwrthgyrff polyclonaidd a geir trwy imiwneiddio anifeiliaid ag antigenau dadnatureiddio yn gymysgeddau o wrthgyrff sy'n benodol i epitopau unigol a gellir eu defnyddio'n gyffredinol i ganfod strwythurau naturiol neu broteinau targed dadnatureiddio.Un o fanteision ychwanegol defnyddio proteinau dadnatureiddiedig fel imiwnogenau yw bod proteinau dadnatureiddiedig yn tueddu i fod yn fwy imiwnogenig a gallant ysgogi ymateb imiwn cryf mewn anifeiliaid.
Mae system fynegiant Escherichia coli fel arfer yn cael ei dewis at ddibenion antigenig oherwydd dyma'r system fwyaf costus o ran amser ac arian.Er mwyn gwella'r posibilrwydd o fynegiant protein targed a chyfleustra puro, weithiau dim ond darn bach o'r protein targed, fel parth penodol, a fynegir.
Strwythur tri dimensiwn proteinau
Maes Penodol Protein
Os mai pwrpas paratoi gwrthgyrff yw canfod wb yn unig, mae'n ddarbodus ac yn gyflym defnyddio peptid bach synthetig fel antigen, ond mae risg o imiwnogenigrwydd gwan neu an-regeniity oherwydd detholiad amhriodol o segment peptid.Gan fod paratoi gwrthgyrff yn gofyn am gyfnod hir, mae dau neu dri segment peptid gwahanol yn aml yn cael eu dewis i baratoi gwrthgyrff gan ddefnyddio antigen polypeptid i sicrhau cyfradd llwyddiant yr arbrawf.
Mae'n ofynnol i burdeb antigen polypeptid ar gyfer imiwneiddio fod yn fwy na 80%.Er y gall purdeb uwch yn ddamcaniaethol gael gwrthgyrff gyda gwell penodoldeb, yn ymarferol, mae anifeiliaid bob amser yn cynhyrchu nifer fawr o wrthgyrff amhenodol, gan guddio manteision purdeb antigen.
Yn ogystal, rhaid croesgysylltu'r gwaith o baratoi gwrthgyrff o beptidau bach â'r antigen cludo priodol i wella ei imiwnogenedd.Dau gludwr antigenig cyffredin yw KLH a BSA.
Amser post: Maw-23-2023